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白菜黑斑病當(dāng)前研究狀態(tài)

白菜是我國栽培蔬菜中分布最廣、種植面積最大的蔬菜作物,在白菜(白菜人才)的種植過程中,常遭受病毒病、霜霉病、軟腐病、黑斑病和黑腐病等病菌的侵染,如一些品種的抗病性較差,致使產(chǎn)量下降,局部甚至絕產(chǎn)絕收。白菜黑斑病是葉部常見病害之一,全國各地分布廣泛。以春秋兩季發(fā)生普遍,病害嚴(yán)重除造成減產(chǎn)外,莖葉變苦,品質(zhì)下降,種株染病不僅影響種子產(chǎn)量,還可使種子帶菌。該文主要從大白菜黑斑病的病原研究、抗性鑒定、抗性遺傳規(guī)律等方面進(jìn)行概述,以期為該病害的相關(guān)研究工作提供借鑒。
1 黑斑病病原的相關(guān)研究
    白菜黑斑。ㄦ湼矜邔貯lternaria)由鏈格孢屬真菌引起,包括蕓薹鏈格孢Alternaria brassicae,甘藍(lán)鏈格孢A.brassicicola 和蘿卜鏈格孢A.japonica 3個(gè)種,其中秋冬白菜黑斑病一般由蕓薹鏈格孢引起,通過蔬菜種子及雜草和植株殘?bào)w等途徑傳播危害白菜生產(chǎn)。黑斑病菌傳統(tǒng)分類的主要依據(jù)是分生孢子和喙的形態(tài)。李明遠(yuǎn)等對蘿卜鏈格孢形態(tài)、培養(yǎng)性狀、病原菌侵染和田間癥狀等進(jìn)行了觀察,并對白菜上的3 種鏈格孢和細(xì)交鏈格孢作了對比分析,表明借助多個(gè)性狀可鑒定蘿卜鏈格孢,但是由于鏈格孢屬內(nèi)不同種之間培養(yǎng)性狀不穩(wěn)定,且高度相似和重疊,實(shí)際操作中用傳統(tǒng)方法很難鑒定到種的水平。郭京澤等探索了鏈格孢屬中間顯著差異性狀對區(qū)分種和種間內(nèi)株系的作用,并且分析了這些性狀的穩(wěn)定性,認(rèn)定鏈格孢屬的分類應(yīng)選擇更多的分類性狀,在分類單元的描述方法上應(yīng)該是差異顯著性狀的集合體。王風(fēng)敏等針對北方春夏兩季對病原菌進(jìn)行分類,結(jié)果表明在不同時(shí)期侵染大白菜的黑斑病病原菌不同,春季大白菜黑斑病由甘藍(lán)鏈格孢引起,而進(jìn)入秋季則由蕓薹鏈格孢引起,原因可能為夏秋兩季溫度不同,夏大白菜與秋大白菜交叉期的存在,延長了黑斑病的侵染。近年來對真菌的5.8S rDNA 及其側(cè)翼的內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)進(jìn)行測序,根據(jù)遺傳背景進(jìn)行真菌系統(tǒng)發(fā)育和分類鑒定研究,成為國際上廣泛使用的技術(shù)。通過研究真菌核的染色體序列可分析不同株系的毒力變異和起源關(guān)系,為種的鑒定提供分類方面的證據(jù)。Jasalavich 等對十字花科蔬菜有致病性的鏈格孢rDNA 部分序列進(jìn)行了分析比較,表明蕓薹鏈格孢、甘藍(lán)鏈格孢、蘿卜鏈格孢等病原菌ITS1 和ITS2區(qū)包含較多變異,ITS1 比ITS2 有更大的序列變異,ITS1 序列長度變異大于ITS2 區(qū),每一種的序列長度均不同,ITS1 區(qū)的堿基構(gòu)成變異比ITS2 區(qū)更大,在種的水平上的變異主要在ITS1 區(qū),而屬的水平上的變異主要在ITS2 區(qū)。并提出可以根據(jù)ITS1 區(qū)的變異設(shè)計(jì)種轉(zhuǎn)化性探針和引物實(shí)現(xiàn)對植物材料上或純培養(yǎng)的鏈格孢的種的鑒別。肖長坤等在對十字花科蔬菜黑斑病菌3 個(gè)種及相近種的5.8S rDNA 和其側(cè)翼ITS 區(qū)進(jìn)行測序的基礎(chǔ)上,分別設(shè)計(jì)合成了鑒定白菜黑斑病菌3 個(gè)種的特異性引物。PCR 擴(kuò)增結(jié)果表明:A bre1 和Abre2 引物對能特異性擴(kuò)增蕓苔鏈格孢(A.brassicae)371bp 的片段,A bra1 和A bra2 引物對能特異性擴(kuò)增甘藍(lán)鏈格孢(A.brassicicola) 457bp 的片段,A jap1和A jap2 引物對能特異性擴(kuò)增蘿卜鏈格孢(A.japonica) 411bp 的片段,而且其他近源種未擴(kuò)增出目標(biāo)片段,說明這3 個(gè)引物對可以作為十字花科蔬菜黑斑病菌3 個(gè)種快速檢測鑒定的分子特征標(biāo)記。

 在該鑒定技術(shù)的基礎(chǔ)上,可以進(jìn)一步建立白菜種子攜帶黑斑病菌的快速檢測以及該病害的田間快速診斷體系,從而指導(dǎo)該病害的有效管理。
2 白菜黑斑病抗性鑒定研究
    張淑霞等采用L9(34) 有重復(fù)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)在15、20、25 ℃ 3 個(gè)光照培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行,每個(gè)處理12株,3 次重復(fù),得出大白菜苗期抗黑斑病最佳條件為大白菜2 片真葉期, 孢子液濃度為2 400 個(gè)孢子/ mL,環(huán)境溫度為20 ~ 25 ℃。采用該鑒定方法為當(dāng)?shù)?片真葉充分展開時(shí)接種黑斑病菌,采用滴接法,滴在真葉上,在20 ℃黑暗下保濕24 h,然后正常管理3 d,從第4 天起葉溫保濕,白天揭開給以光照,在第8 天保濕24 h 進(jìn)行調(diào)查及發(fā)病情況。利用方差分析對黑龍江省部分大白菜資源進(jìn)行苗期抗病篩選, 在36 份材料中,得出抗病材料3 份, 中抗材料20 份。占絕大多數(shù),感病品種材料12 份,高感病品種1 份?剐圆牧现杏2 份是多倍體品種,體現(xiàn)了多倍體材料抗逆性,說明利用染色體加倍可能是抗黑斑病育種的一種有效途徑。中抗材料居多,也是黑斑病較輕的一個(gè)原因,所以合理進(jìn)行品種布局,是減輕黑斑病發(fā)生的一個(gè)可行方法。王風(fēng)敏等對甘藍(lán)鏈格孢表現(xiàn)為感病的品種進(jìn)行調(diào)查研究卻發(fā)現(xiàn)表現(xiàn)為感病類型,而對蕓薹鏈格孢感病的類型對蕓薹鏈格孢卻表現(xiàn)為抗病,說明植物抗病性收多種因素影響,病原菌或者生理小種的改變可能完全導(dǎo)致不同的抗性表現(xiàn)。因此,不同季節(jié)種植應(yīng)根據(jù)不同病原菌的抗性,選擇表現(xiàn)抗性的品種。
3 白菜黑斑病的抗性遺傳規(guī)律研究
    張鳳蘭等采用4 × 4 完全雙列雜交對大白菜苗期黑斑病的抗性遺傳規(guī)律進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,兩個(gè)抗病親本和兩個(gè)感病親本抗性差異顯著;兩個(gè)抗病親本雜交的F1 仍表現(xiàn)抗病,兩個(gè)感病親本的F1仍表現(xiàn)感病,一個(gè)抗病親本和一個(gè)感病親本雜交的F1 表現(xiàn)中間偏抗類型, F1 的抗性和中親值差異顯著,但未達(dá)到極顯著水平,為部分顯性,正反交差異不顯著呈現(xiàn)核遺傳,細(xì)胞質(zhì)作用不顯著,大白菜苗期對黑斑病的抗性以加性效應(yīng)為主。楊廣東等采用2 個(gè)抗病品系和2 個(gè)感病品系作為試材,并配制雜交組合,采用真葉期人工接種病菌鑒定F1、F2、BC1 和BC2 雜種抗性的方法,研究了大白菜對黑斑病的抗性遺傳規(guī)律。結(jié)果表明,大白菜對黑斑病的抗性為顯性遺傳并受單個(gè)顯性基因控制。劉煥然等研究表明大白菜對黑斑病抗性屬數(shù)量遺傳,由7 ~ 10 對以上基因控制,符合加性─顯性模型,回交效應(yīng)顯著,表明主要為核基因遺傳。


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