飼料產品質量安全檢測方法大全
1.2 色譜分析技術
色譜分析的基本原理是讓混合物通過互不混溶的兩相,由于各組分的結構、性質不同,因此可以在兩相中進行分離。飼料檢測中應用的色譜儀器主要有氣相色譜儀和液相色譜儀。
我國國家標準中規(guī)定的飼料中農藥殘留如有機磷(GB/T18969—2003)、除蟲菊酯類(GB/T19372—2003)、氨基甲酸酯類(GB/T19373—2003)等大多數農藥殘留的檢測均采用氣相色譜分析方法。隨著飼料中油脂的添加,對油脂質量及種類的檢測逐漸成為關注的重點,因此開始應用氣相色譜對飼料中脂肪酸種類及含量進行檢測,以確定飼料中油脂的組成。此外飼料香味劑的檢測主要包括對其香氣、理化指標、穩(wěn)定性和有效性等進行檢測,由于香味劑是非常復雜的化合物,在國外多采用氣相色譜-質譜聯(lián)用技術進行定性定量分析。我國對香味劑的堿性主要是對其中味料部分的一些成分進行檢測,如谷氨酸鈉、肌苷酸、鳥苷酸、糖精鈉、葡萄糖等采用高效液相色譜方法進行檢測;對于香氣部分如含有丁酸乙酯、乳酸乙酯、香草醛等成分采用氣相色譜進行檢測。飼用防霉劑目前國內外普遍采用氣相色譜或高效液相色譜方法進行檢測,有些方法直接采用食品添加劑檢測標準方法,例如飼用防霉劑中的脂肪酸類物質,包括甲酸、乙酸、丙酸、山梨酸、苯甲酸等采用氣相色譜技術,用有機溶劑丙酮/石油醚等提取,經過離心凈化,通過色譜柱或毛細管柱的分類,用電子捕獲、氫焰等檢測器進行定量測定。飼用抗氧化劑是添加到飼料中,能夠阻止飼料或延遲飼料氧化,提高飼料穩(wěn)定性和延長貯存期的一類物質,常用的有乙氧基喹啉、二丁基羥基甲苯(BHT)、丁基羥基茴香醚(BHA)等。對于抗氧化劑的檢測技術多采用高效液相色譜或氣相色譜技術進行分析。如飼料中BHA、BHT的檢測采用液相色譜技術,經乙烷溶解提取、乙腈萃取濃縮,異丙醇稀釋后注入高效液相色譜儀中進行分離檢測,用紫外檢測器進行定量分析。乙氧基喹啉、BHT也可以采用氣相色譜方法,經毛細管柱分離,用氫焰檢測器測定其含量。
液相色譜在飼料檢測中的應用十分廣泛,例如飼料中維生素的反相高效液相色譜分析方法已經列為國家標準分析方法。氨基酸的檢測從以氨基酸分析儀為主逐步轉向普遍采用的高效液相色譜方法:經鄰苯二甲醛(OPA)和異硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生后,經C18柱分離,紫外或熒光檢測器進行檢測。該方法的分析時間短,靈敏度高,極易在大中型飼料廠中普及應用。液相色譜還廣泛應用于飼料中藥物的檢測,隨著國家對飼料安全問題的重視,飼料標準化委員會組織制定了大批飼料中違禁藥物的檢測方法,如飼料中鹽酸克倫特羅、呋喃唑酮、磺胺喹惡啉、磺胺二甲基嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、鹽酸氯苯胍等,飼料中西馬特羅、地西泮、苯巴比妥、氯丙嗪、己烯雌酚、雌二醇、玉米赤霉烯酮、氫化可的松、氯霉素、金霉素、土霉素、氯苯胍、喹乙醇、莫能菌素、拉沙絡西鈉、桿菌肽鋅、氯羥吡啶、尼卡巴嗪、鹽霉素、林可霉素、百里霉素、鹽酸氨丙啉、二甲硝咪唑等等,大部分采用液相色譜或液相色譜-質譜聯(lián)用技術進行分析。此外,也進行了一些飼料中藥物尤其是違禁藥物的分析研究工作,如Wang等(2010)通過固相萃取等凈化技術,對飼料中硝呋烯腙進行液相色譜分析,檢出限達到0.05mg/kg,定量限為0.2mg/kg。對飼料中多種藥物的同步檢測分析是現(xiàn)今飼料分析技術的主流方向之一。Shen等(2009)應用高效毛細管電泳測定了飼料中5種苯并咪唑類藥物,檢出限低于2mg/kg,所有藥物的回收率均大于73%,變異系數低于10%。Galarini等(2009)應用液相色譜熒光檢測器和紫外檢測器檢測了飼料中的11種喹諾酮類藥物,檢出限為0.04~0.8mg/kg,回收率為69%~98%,變異系數低于10%。Driver等(2009)用柱后衍生離子交換色譜熒光檢測了飼料中的新霉素B和新霉素C,在治療劑量的飼料產品中新霉素含量范圍為50%~0.005%(質量比,以新霉素為基礎計)時,新霉素B平均回收率是100.4%,變異系數2.28%,新霉素C的回收率是97.5%,變異系數4.36%,均有良好的分析效果。
應用液相色譜對飼料調質劑的檢測分析逐漸推廣。飼料調色劑或者著色劑有天然提取的色素和人工合成色素,主要采用液相色譜儀器進行定量分析。如飼料中葉黃素的檢測,目前精確測定的最可靠方法是高效液相色譜方法,根據1984年美國公職分析化學家協(xié)會(AOAC)提出柱層析色譜法測定總葉黃素,直接用分光光度計進行檢測。我國2008年上半年出臺了飼料添加劑葉黃素檢測的國家推薦標準GB/T21517—2008,比柱層析方法更加簡單,操作步驟少,大大提高了葉黃素檢測工作的推廣。
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